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JDB电子酶联免疫吸附试验技术服务

2016-03-30
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接见量:

酶联免疫吸附试验(ELISA)技术服务:各类酶联免疫吸附试验的检测、酶联黑点图像的分析、克隆形成自动分析、溶血黑点尝试、病毒斑等。

酶联免疫吸附试验


免疫酶技术(immunoenzymatic technique)  最早利用的免疫酶技术是免疫酶组织化学染色 ,即用象征的抗体与标本中的抗原产生特异性结合 ,当参与酶的底物时 ,在酶的作用下经一系列生化反映产生有色物质 ,借助光镜作出定位判断。目前 ,利用最宽泛的是酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay ,ELISA)。该法特异性强 ,敏感性高 ,既可检测抗体 ,又能测定可溶性抗原。ELISA常选取的酶为辣根过氧化物酶(hosradish peroxidase ,HRP) ,其底物是二氨基苯胺(DAB) ,底物被分化则呈棕褐色 ,可目测或借助酶标仪比色。

酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上 ,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反映的定性和定量检测步骤。

ELISA是将抗原与抗体免疫反映的特异性 ,同酶的高效催化作用相结合 ,而成立的一种非放射性象征免疫检测技术D芄欢ㄐ曰蚨考觳馓逡褐械陌肟乖⒖乖涂固。该技术用化学步骤使酶与抗原或抗体結合天生酶象征物 ,或通过免疫步骤将酶与抗酶抗体相结合天生酶抗体结合物。

酶联免疫吸附试验(Elisa)的根基道理有三条:
(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表表 ,可能是蛋白和聚苯乙烯表表间的疏水性部门相互吸附 ,并维吃熹免疫学活性;
(2)抗原或抗体可通过共价键与酶衔接形成酶结合物 ,而此种酶结合物仍能维吃熹免疫学和酶学活性;
(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后 ,可凭据参与第五的色彩反映来判定是否有免疫反映的存在 ,并且色彩反映的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的 ,因而 ,能够按底物显色的水平显示试验了局。
酶联免疫分析用抗原与抗体的特异反映将待测物与酶衔接 ,而后通过酶与底物产生色彩反映 ,用于定量测定。测定的对象可所以抗体也可所以抗原。

酶联免疫分析测定步骤:重要钻研步骤有间接法(常用于检测抗体)/双抗体夹心法(常用于检测抗原)/抗原竞争法(既可检测抗原 ,亦可检测抗体)。
1、测定抗体的间接法
a.将抗原吸附于固相载体表表 ,洗涤除去未吸附的抗原。
b.加抗体 ,保温 ,形成抗原—抗体复合物洗涤除去其余的杂蛋白。
c.加酵标抗抗体 ,保温 ,洗涤。
d.参与底物 ,测定底物的降解量二抗体量。
2、测定抗原的双抗体夹心法
首先将特异抗体的免疫球蛋白吸附在反映板凹孔内 ,洗涤除去未吸附的抗体 ,参与含有抗原的待测溶液 ,保温形成抗原—抗体复合物 ,洗涤除去杂蛋白后再加上述特异抗体 ,由于抗原是多价的并未被抗体鼓和 ,经保温则可形成抗体—抗原—抗体复合物 ,洗涤后加酶标抗抗体 ,保温洗涤后加底物呈色 ,遏制酶活性 ,比色测定抗原量。
3、测定抗原的竞争法

将含有特异抗体的免疫球蛋白吸附在两份一样的载体(甲)和(乙)中 ,而后在(甲)中参与酶标抗原和待测抗原 ,(乙)中只加酶标抗原 ,其浓度一样于(甲)中参与的酶标抗原的浓度 ,保温洗涤后加底物呈色。待测液中未知抗原量愈多 ,则酶标抗原被结合的量就愈少 ,有色产品就愈少 ,以此便可测出未知抗原的量 ,即蹬宗(甲)与(乙)底物降解量的差值。

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电话:021 58591500


以上内容是关于酶联免疫吸附试验,酶联免疫吸附测定的介绍 ,起源于JDB电子官网。


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