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动物尝试服务:SCID幼鼠介绍

SCID幼鼠表观与通常幼鼠差距不大

2015-07-03
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接见量:

SCID幼鼠表观与通常幼鼠差距不大,有毛,被毛白色,体沉发育正常 。但胸腺、脾、淋趋附的沉量不及正常的30%,组织学上阐发为淋巴细胞显著缺点 。胸腺多位脂肪组织包抄,没有皮质结构,仅残存髓质,重要有类上皮细胞合成纤维细胞组成,边缘偶见灶状淋巴细胞群 。脾白髓不显著,红髓正常,脾幼体无淋巴细胞荟萃,重要有网状细胞组成 。淋趋附无显著皮质区,麸皮质区缺失,有网状细胞占据 。幼肠粘膜下和支气管淋巴集结较少见,结构内无淋巴荟萃 。出格值妥贴心的是,少数SCID幼鼠,在青年期可出现肯定水平的免疫职能复原,此即为SCID幼鼠的渗漏景象 。其渗漏景象不遗传,但与幼鼠的春秋、品系、豢养环境有关 。SCID 幼鼠极易习染,在高度干净的SPF环境下可存活一年以上,窝产仔数为3-5只 。SCID幼鼠是继裸鼠出现之后,人类发现的又一种极度有价值的免疫缺点动物 。

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 SCID幼鼠

起源:SCID幼鼠是由常染色体隐性突变(scid)而来 。

1980年Bosma从Fox Chase癌症中心豢养的C.B-17/lcr 幼鼠群中发现该突变 。该品系阐发出严沉的结合免疫缺点症状,B细胞和T淋巴细胞职能缺失 。同时该品系有正常的NK细胞、巨噬细胞和粒细胞 。

1991年Charles River从Iffa Credo引入 。

毛色:无毛,白化布景
个性和用处:宽泛利用于人类免疫学和病毒学、肿瘤学、生理学、血液病学、病理学等方面的钻研,能接受人体正常组织的移植而成为一种嵌合体幼鼠(即SCID-hu模型)进行人体免疫职能沉建和肿瘤学方面的钻研 。 
1. 很多不能习染其他品系幼鼠的人类寄生虫能习染SCID幼鼠,病变与人类类似,是钻研人类丝虫病的动物模型 。
2. 对于人类肿瘤的移植成活率高达36.9%,而通常裸鼠为16.9% 。对白血病和恶性肿瘤的转移率高,且能宽泛扩散,与人体肿瘤生物学行为极为类似 。肿瘤的浸润、转移与人类肿瘤自觉性转移类似 。
3. 是钻研淋巴细胞分化作用和调控作用的重要模型,是钻研免疫缺点与自觉性淋巴细胞瘤之间关系的重要模型 。
参考数据:
数据起源维通利华
毛色白化
成熟期(雄性)6-8周
成熟期(雌性)6-8周
交配比例1:2
发情周期3-5天
怀胎期17-21天
均匀每窝产仔数4-5只
诞生体沉1-2g
离乳体沉(雄性)9-12g
离乳体沉(雌性)9-12g
哺乳期21天
均匀日饲料亏损量5g(每100g体沉)
均匀日饮水亏损量6-7ml(每100g体沉)
种鼠裁减周期(雄性)5-6月
种鼠裁减周期(雌性)5-6月
豢养温度21±2℃
相对湿度40-70%
光照周期12/12幼时
运输过程体沉亏损10%
SCID幼鼠豢养滋生

由于SCID幼鼠的免疫职能严沉缺点,所以需使之维持在无特定病原体(SPF)状态下,预防致病微生物的习染 。在存在幼鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus)或嗜肺巴氏杆菌(Pasteurellap Pneumotropica)的通常环境中,SCID幼鼠不能豢养成功 。SCID幼鼠很容易受卡氏肺囊虫习染而发病,使其不能正常滋生,寿命缩短,失去尝试利用价值 。毫无疑难,T和B淋巴细胞缺点将导致该幼鼠对多种致病微生物易感而发病 。 
在SPF前提下,SCID幼鼠的寿命可长达1年以上 。对于SCID基因纯合的幼鼠可选取纯合子之间的兄妹交配进行滋生 。SCID幼鼠滋生能力较弱,均匀每胎生育3.4只仔鼠,不育率约为30℅,成活率约为70℅ 。SCID基因对幼鼠的滋生,除了因免疫缺点而导致动物易受病原体习染的间接影响表,是否还直接影响动物的生育职能还有待于进一步钻研 。

为了维持动物的SPF状态,SCID幼鼠应该豢养于有空气过滤装置的樊篱系统中 。动物饲料、饮用水、垫料、笼具和手术器械等都需经过消毒灭菌处置后,能力使用 。为了使SCID幼鼠能成功地滋生,动物饲料应该选取全价平衡饲料,蛋白质含量不低于20℅ 。豢养环境温度节造在20~30℃,湿度在40~70℅为适 。

SCID幼鼠生物学特点

1. 解剖学特点: 

SCID幼鼠表观与普遍幼鼠无差距,体沉发育正常,但是淋巴器官发育出缺点 。其胸腺相对沉量仅为同龄正常对照幼鼠的6℅左右,脾脏相对沉量仅为正常的3℅,淋趋附极幼,常散在于脂肪组织之中,难以用肉眼查见,在显微镜下估计其大幼仅为正常的1/3 。

2.组织学特点:SCID幼鼠的组织学特点凸起地表此刻与免疫缺点有关的组织结构上 。其体内淋巴组织极为异常,显著阐发为淋巴细胞不足的症状,但是粒细胞和巨噬细胞的散布呈正常状态,SCID幼鼠表周血白细胞较少,重要由于淋巴细胞组分削减所致 。淋巴细胞仪占白细胞总数的10~20℅ 。相反,对照组动物的淋巴细胞占总数的70℅左右,SCID幼鼠胸腺没有皮质结构,仅保留残存的髓质,重要由网织细胞和成纤维细胞组成 。脾脏白髓不显著,红髓正常 。脾幼体无淋巴细胞荟萃,重要由网状细胞组成 。淋趋附无显著皮质区,副皮质区缺失,呈淋巴细胞脱空状,由网状细胞所占据 。幼肠粘膜下和支气竹淋巴集结较少见,结构内无淋巴细胞荟萃 。但是SCID幼鼠骨髓组织结构呈正常状态 。

3. 自觉性肿瘤:SCID幼鼠自觉性T细胞淋巴瘤(重要在胸腺)的发病率在15℅左右 。而正常对照组动物却没有发现这种肿瘤的病例 。淋巴瘤显著发源于胸腺,并可产生肺、淋趋附、脾、肝和肾转移 。瘤体由大而均匀一的淋巴母细胞组成,细胞较大,染色质丰硕,含有较大的核仁,胞浆呈嗜碱性 。肿瘤细胞携带T细胞表表象征抗原 。这种肿瘤的瘤块或造就细胞悬液在移植到组织相容性宿主体内后,可优良地成长传代 。目前,尚未弄清:SCID突变基因与T细胞胸腺瘤高发之间的关系 。

4. 免疫学特点:SCID幼鼠在所有T和B淋巴细胞职能测试中为阴性 。其脾细胞对T和B细胞割裂素和在同种混合淋巴反映试验中无增殖应答,不足B细胞和细胞毒T细胞集落形成单元 。对表源性抗原无抗体和细胞免疫反映 。不能倾轧同衷欷肤移植 。体内不足携带前B组胞、B细胞和T细胞表表象征的细胞 。

SCID幼鼠非淋巴性造血细胞分化并未受该突变基因的影响 。巨噬细胞、粒细胞、巨核细胞和红细胞呈正常状态 。肥大细胞前体正常,但由于不足T细胞产生的淋巴因子而不能正常分化,职能出缺点 。SCID抗原呈送细胞职能正常 。巨噬细胞在T细胞淋巴因子和单核细胞增多性李斯特菌诱导下,其重要组织相容性抗原Ia表白正常 。天然杀伤细胞(Nk cell)和淋巴因子激活杀伤细胞(LAK cell)的分化和职能在SCID幼鼠也阐发为正常状态 。

5. 淋巴系统的沉建:SCID幼鼠在接受组织相容性一样的正常骨髓或胎肝细胞后,其淋巴组织将获得部门或齐全沉建,复原正常职能 。骨髓的持久造就淋巴细胞同样能使SCID幼鼠的免疫系统得以复原 。沉建的淋巴细胞来自供体而不是宿主 。相反,接受SCID幼鼠骨髓细胞的正常幼鼠(经辐射处置)体内并没有检出来自供体的淋巴细胞 。这些尝试了局进一步证明:SCID幼鼠的免疫缺点是由于突变基因直接影响到淋巴细胞自身的分化和发育所导致,而不是由于淋巴细胞发育微环境的缺损所造成 。再者,成年SCID幼鼠接受非致死辐射处置之后,就能预防其淋巴系统沉建不齐全的景象 。

6. 分子生物学特点:在SCID幼鼠淋巴天生器官内,可检出Ig和T细胞受体(Tcr)基因的mRNA转录本 。从而证明SCID幼鼠拥有B和T细胞谱系的种系细胞,SCID基因对淋巴细胞分化的影响产生在干细胞分化成为B和T谱系细胞之后 。在淋巴细胞发育过程中,SCID幼鼠抗原受休基因(Ig和Tcr位点)的沉组出现异常,不能正常沉排,使细胞不能产生职能正?乖芴宓鞍 。受影响的淋巴细胞将在成熟之前殒命,或被体内巨噬细胞、粒细胞或NK细胞所解除 。

目前以为SCID幼鼠的抗原受体基因VDJ编码挨次的沉组酶活性异常,使VDJ区域在沉排时,其裂端不能正常衔接,造成沉排后的抗原受体基因的缺失和异常 。持久造就骨髓B细胞的钻研了局与上述假说一致 。

7. 渗漏特点:并非所有SCID幼鼠都不足职能性的淋巴细胞,有2~23℅个别拥有有限数量的T和B细胞,其免疫职能有极幼水平的职能复原,即:所谓的渗漏SCID幼鼠(leak SCID mice) 。这些个别固然携带纯合SCID基因,但是其少量淋巴细胞能不受该突变基因的影响而发育成熟 。动物谱系分析和选择造就的尝试证明SCID幼鼠的渗漏特点并不遗传,其在群体中出现的数量取决于动物春秋和豢养环境 。有趣的是,渗漏个别的胸腺淋巴瘤发病率为40℅,高于免疫职能齐全缺点的个别(10℅) 。

渗漏SCID幼鼠的血清内可检测出肯定水平的免疫球蛋白 。在其组织内能检出少量B细胞克隆 。50℅的渗漏个别能倾轧同种异型皮肤移植 。胸腺细胞有T细胞受体(TCR)基因的沉排产生,并且可检出携带T细胞特异性抗原象征的细胞 。然而,渗漏SCID幼鼠远非与正常个休类似 。其脾细胞不能表白淋巴细胞抗原,对淋巴细胞割裂素无应答反映 。淋巴系统组织学结构也与通常SCID幼鼠类似 。

目前对SCID幼鼠渗漏特点和机造有两种假说,一种以为,在SCID幼鼠淋巴细胞发育过程中,固然沉组酶系统异常,抗原受体基因也会无意产生正常有职能的沉排,从而导致职能性淋巴细胞的产生 。另一种以为在SCID幼鼠淋巴细胞发育过程中,由于某种后夭变动或SCID基因位点的回复,导致部门淋巴细胞的沉组酶活性复原正常 。目前,所获得的尝试证据对这两个并不相互倾轧的假说都有利 。因而,SCID幼鼠的渗漏机造还需进一步钻研 。

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