免疫学检测技术分析服务

?  免疫印迹
?  免疫共沉淀
?  ELISA
?  免疫组化
?  免疫荧光

JDB电子以抗体平台为主题成立了一系列有关的后续免疫学检测平台，有ELISA,,WesternBlot等。
ELISA检测的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶象征。产品的量与标本中受检物质的量直接有关，凭据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效能很高，间接地放大了免疫反映的了局，使测定步骤达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

Western Blot是凭据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的步骤，用于检测经电泳或黑点杂交后固定于膜上的蛋白质的检测。特异、不变的液态酶标抗体和相应的底 物，保障了急剧、正确的检测；而预防了放射性物质的使用，现已成为蛋白分析的一种通例技术，对蛋白进行定性和半定量分析。

免疫学检测技术

一、抗原抗体反映
二、淋巴细胞的检测技术
三、免疫学常用的分子生物学技术

1、抗原抗体反映

抗原抗体反映的特点：特异性、可逆性、阶段性、可见景象；
抗原－抗体反映的分类：沉淀反映、凝聚反映、免疫象征技术；
其中免疫象征技术是指用荧光素、酶及放射性同位素示踪物质象征抗原(或抗体)进行抗原抗体反映，通过示踪物质来检测未知抗原或抗体的一种步骤。该步骤可提高活络度。匹敌原或抗体进行定性或定量及定位。

2、淋巴细胞的职能测定技术

（一）淋巴细胞的分离：
  ①表周血单个核细胞分离
  ②淋巴细胞亚群的分离及鉴定（表表标志选择性、纯化淋巴细胞亚群）

（二）淋巴细胞的职能测定技术
体表法：
    淋巴细胞增殖实试验
    细胞毒试验
    酶联免疫黑点法（enzyme-linkedimmunospot, ELISPOT）
体内法： 
①OT试验(细胞免疫）
②细胞因子检测： 机体的免疫细胞(如淋巴细胞、单核巨噬细胞)及非免疫细胞能产生分歧种类的细胞因子，它们在免疫应答中起调控作用。细胞因子检测是判断机体免疫职能的沉要指标，对某些疾病的诊断、病程观察、预后判断等是极度必要的。

检测步骤：
a.生物学活性检测(Bioassay)：依赖细胞株增殖法/靶细胞杀伤法/细胞病变抑造法/细胞因子诱导产品分析法
b.免疫学检测法：由于细胞因子拥有抗原性，所以能够利用抗原-抗体反映来定量检测；ELISA：利用细胞因子的单克隆抗体和多克隆抗体；ELISPOT：Enzyme-linked immunospot assay,酶联免疫黑点试验；流式细胞仪
c.分子生物学检测法：利用细胞因子的探针进行检测
d.生物芯片检测

3、免疫学常用的分子生物学步骤

①免疫印迹：高辩白率的凝胶电流与免疫化学分析技术相结合杂交技术，拥有凝胶电流分析的容量大高分辨率和免疫化学分析的敏感度高、特异性强蹬着点。免疫印迹技术用来检测蛋白质个性、表白及散布的最常用的步骤。

②免疫PCR：抗原与抗体反映与 PCR 技术相结合的一种新技术，道理同 ELISA，分歧的是 PCR 的放大系统取代了酶象征的放大效应，此步骤可丈量微量抗原或抗体。

免疫检测技术的利用

免疫检测技术以宽泛利用于生物科学的各个领域。
1.免疫疾病诊断
用免疫血清学步骤对人和动物传染病、寄生虫病、肿瘤、自身免疫病和畸形反映疾病进行诊断，是免疫技术最凸起的利用。尤其是酶标抗体技术，已成为多种传染病的通例诊断步骤，如已有的人各型肝炎、猪瘟等 ELISA 试剂盒，它们轻便、急剧，又拥有高度的敏感性和可沉复性。

2.动物植物生理活动钻研
动植物中存在一些如激素、维生素等活性物质，它们在体内含量极微少，但在调节机体的生理活动中起沉要作用，因而通过度析测定这些生物活性物质的含量及变动来钻研机体的各类生理职能（如成永生殖等）。由于这些物质含量极低，用通例化验步骤难以正确测出。目前放射免疫测定和酶免技术已能精确测出 ng(10 -9 g) 及 pg(10 -12 g) 水平的物质，它们已成为测定动物、植物、虫豸中微量激素及其它活性物质，钻研动物、植物生理和生物防治的沉要伎俩。

3.物种及微生物鉴定
各类生物之间的差距都可表此刻抗原性分歧，物各种源越远，抗原性差距越大，因而可用分辨抗原性的血清学反映进行物种鉴定、物种的分类等工作。血清学反映在细菌、病原菌等微生物鉴定和血清型及亚型的分析方面已得到宽泛利用。但对动物种源，植物和虫豸分类方面还是一个新的领域。

4.动物、植物性状的免疫象征
通过度析动物、植物的一些良好性状（如高产、优质、抗逆性等）的特异性抗原，而后用血清学步骤进行象征选择育种，这是一个很有前途的方向，它比分子遗传学象征选择育种轻便。

5.免疫加强药物和疫苗的钻研
疫苗钻研中需用血清学反映和细胞免疫技术测定免疫的成效。在钻研一些免疫加强药物，尤其钻研肿瘤药物时，需用细胞免疫技术分析测定它们对机体细胞免疫职能的加强作用。由于细胞免疫是机体抗肿瘤、抗病毒的一个沉要机造。

6.发病机理钻研
传染病的病原从机体特定部位习染，并在特定组织细胞内增殖，引起发病。一荧光抗体习染或免疫酶组化染色，可在细胞水平上确定发病等病原微生物的习染细胞，还可用于钻研自身免疫病和畸形反映性疾病的发病机理，如免疫复合物的沉积部位的分析。

7.分子生物学钻研

在基因工程的分离、克隆的筛选，表白产品的定性与定量分析，表白产品的纯化等均涉及到免疫技术。如通常用免疫沉淀步骤分离 mRNA 基因，酶标抗体核酸探针（地高辛核酸探针）检测筛选克隆，免疫转印技术分析表白产品的分子量、 ELISA 或 RIA 分析表白量、免疫亲和层析纯化表白产品，免疫步骤分析表白产品的性质如免疫原性。免疫技术已是分子生物学钻研中必不成少的工具。

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