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新闻资讯

iTRAQ尝试技术服务

川沙总部

2017-06-27
|
接见量:

iTRAQ技术道理: 

iTRAQ试剂为可与氨基酸N端及赖氨酸侧链衔接的胺象征同沉元素(isobaric)。在质谱图中,任何一种iTRAQ试剂象征的分歧样本中的统一蛋白质阐发为一样的质荷比。
在串联质谱中,信号离子阐发为分歧质荷比(114~117)的峰,因而,凭据波峰的高度及面积,能够得到蛋白质的定量信息。 

iTRAQ试剂结构:

iTRAQ试剂是一种幼分子同沉元素化学物质,蕴含三部门:
一端是汇报部门 reporter group;
另一端是肽反映部门 peptide reactive group;
中央部门是平衡部门 balance group。
其中: reporter group:质量为114Da、115 Da、116 Da、117 Da,因而iTRAQ试剂共四种。
? peptide reactive group:将reporter group与肽N端及赖氨酸侧链衔接,险些能够象征样本中所有蛋白质。
? balance group:质量为31 Da、30 Da、29 Da、28 Da,使得四种iTRAQ试剂分子量均为145 Da,保障iTRAQ象征的统一肽段m/z一样。
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图1 iTRAQ 试剂结构
 
综上:
    4个起源分歧的一样蛋白样品在一级质谱上阐发一样;
    Balance group在二级质谱产生中性迷失;
    Reporter group 在二级质谱产生4个汇报离子,别离是114、115、116和117;
    通过度析汇报离子的峰强度比值就能够分析统一个蛋白在分歧样品间的表白量比值。

操作流程:

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iTRAQ技术重要特点:

1.分离能力强、分析领域广
2.定性分析了局靠得住,能够同时给出每一个组分的分子量和丰硕的结构信息
3.MS具备高活络度、检测限低
4.分析功夫快,分离成效好
5.自动化水平高
6.iTRAQ技术不仅可发现胞浆蛋白,还有膜蛋白、核蛋白、胞表蛋白7.iTRAQ技术可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、幼于10KD或大于200KD的蛋白
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