中国科研工作者匹敌体试剂问题的反思
川沙总部
2015年5月19日 Nature杂志从美国和加拿大几位资深科学家的亲自经历，深度论述了目前抗体试剂的近况与问题，给全世界科研工作者敲响了警钟。身为中国科研工作者，我们遇到的抗体试剂问题惟恐比国表同业来得更多，当下除了抱怨，我们更应深刻反思：若何能力获得高质量、相宜的抗体试剂。
获得高质量、相宜的抗体试剂也并驳诘事，我们必要在以下三个方面加以甄别：1.优良的抗体供给商；2.过硬的冷链物流系统；3.正规的销售（直销/分销）渠路。
1. 优良的抗体供给商
优良的抗体供给商应具备以下前提或者能为客户提供以下信息：抗原序列选择、抗体纯化方式、抗履历证数据、利用指南。
i. 抗原序列选择
抗原序列选择至关沉要，直接决定了抗体的特异性/低交叉反映和抗体产量，因而抗原序列选择不仅要保障全基因组内同源序列最低，同时还要排除信号肽和蛋白跨膜区序列。
ii. 抗体纯化
抗体纯化目前主流的三种方式别离是：盐析法粗纯、Protein A/G通用型纯化和特异抗原纯化柱，三种方式的纯化成效和抗体效价顺次提高。其中Protein A/G通用型纯化的成效和成本适中，目前大部门抗体试剂公司都选取该方式进行大规 ？固宄霾。要想获得较高质量的抗体，必要通过特异抗原纯化柱，但由于涉及固定特异抗原等操作，成本相应是最高的，然而，使用该步骤纯化出来的抗体纯度和特异性最高。
iii. 抗履历证数据
目前好多供给商都有抗履历证数据，但我们并不知路这些验证数据的具体起源。好多抗体都有WB验证数据，但很少有供给商表明WB是在哪些细胞系内验证，若是是过表白的细胞系，那WB验证意思就不大了。同样，免疫组化或免疫荧光也存在类似问题，验证的数据具体起源于哪种组织、哪种病理样本鲜有提及。而起源分歧，尝试了局会千差万别。供给商往往用一种最容易得到尝试室数据的样本做尝试，但这样的抗体用到我们自己的尝试时，往往会有多种问题出现。
iv. 利用指南
抗体供给商通常会凭据验证数据推荐有关的利用，所以验证数据对于利用有决定性作用。应该出格把稳，统一支抗体能够做WB，却并不愿定适合于免疫荧光或免疫组化，反之亦然。因而，供给商的抗履历证数据就显得极度沉要了。
以上列出了优良抗体供给商的4条硬性要求，现实中有哪些能很好地做到以上几点呢 ？下面以Sigma-Aldrich提供的HPA金标抗体为例。HPA金标抗体由Human Protein Atlas (HPA)Project设计并验证。
1）HPA金标抗体抗原选择
HPA金标抗体的免疫抗原是沉组人蛋白表位鉴别标签(PrESTs)，表位鉴别标签通常含有50-150个氨基酸。表位鉴别标签经过设计和筛选，使得它们含有怪异的表位，并且适合引发高特异性的抗体产生。通过对人全基因组扫描的方式，确保用于出产抗体的蛋白表位鉴别标签与其它蛋白有最低的同源性。同时，抗原表位还会排除信号肽和蛋白跨膜区。
2）HPA金标抗体亲和层析纯化
HPA金标抗体通过亲和层析方式进行纯化(以PrESTs抗原作为配基，特异抗原纯化柱)，选取三步法免疫层析的纯化工艺：HisABP特异性标签去除，PrESTs特异性捕获，最后通过排阻色谱进行缓冲液的互换，不仅保障了抗体的纯度，同时有利于抗体持久保留。
3）HPA金标抗履历证
每一支HPA金标抗体都经过蛋白芯片、免疫组化、WB和免疫荧光的尝试验证，验证的数据量不仅巨大--每支抗体超过700张尝试验证图片（病理学家认证并注解）在线查问，并且，验证数据是来自于分歧组织和细胞系样本，还会结合参考文件以及生物信息学预测，确保每一个尝试数据的靠得住性。
4）HPA金标抗体利用指南
HPA金标抗体重要以免疫组化/免疫荧光为主，大部门抗体同时支持WB尝试；诙嘀肿橹蛘呦赴难橹ち司，给宽大科研工作者提供了贵重的数据参考。
综上，HPA金标抗体可称得上是优质抗体范例，而Sigma-Aldrich算是优良的抗体供给商之一。
2. 过硬的冷链物流系统
目前冷链物流系统已经极度成熟，各家供给商通常都能保障抗体的低温运输。对于供给商而言，重要是舍得投入，这一点做得比力凸起的有Sigma-Aldrich，抗体收到后，通常冰盒还能对峙2-3天，足以让使用者安心尝试。
3. 正规的销售（直销/分销）渠路
在国内，销售渠路是问题凸起的关键环节，尤以假抗体试剂为甚，好多产品在包装上其实是能够分辨的（科研工作者很少关注，往往以价值为导向）。在利益的驱策下，部门经销商经；嶙约涸熳骺固迨约，贴上假冒标签以次充好；另一个很普遍的景象是从正规渠路购得抗体试剂，通过幼作坊稀释分装后，再销售给科研工作者。无论是以次充好，还是稀释分装，城市给科研工作者都带来好多尝试风险，最后买单的始终是宽大中国科研工作者，不仅耗费金钱和人力，更难以添补的是贵重的功夫成本。
因而在采办渠路上，建议各人尽量从官方指定经销商处采办抗体试剂，抑造赝品的流通。同时，随着电子商务平台的成熟，各人能够直接在各大官方网站订购试剂，这是最安全便捷的采办渠路。关于这点，免不了再次提及Sigma-Aldrich，Sigma-Aldrich是国内最早尝试电子商务的性命科学产品供给商，并且以直销为主导，预防了中央流通环节的问题，加上其壮大的物流系统，很大水平上降低了销售环节可能带来的尝试风险。
面对纷繁复杂的抗体市场，建议各人采办抗体试剂时审慎选择，切勿意图幼利，通过正规销售渠路采办优良供给商的抗体，最大限度降低因抗体质量问题给我们带来的损失。
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